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了解單分子層面復(fù)雜的生物過程是預(yù)防和治療癌癥及其他疾病的關(guān)鍵,聲學(xué)力譜儀作為即時可用的單分子檢測儀器,實現(xiàn)了活體測量技術(shù)的突破以及分子水平上相互作用的成像。
AFS單分子聲力譜儀(聲鑷)技術(shù)
聲學(xué)力譜(AFS),是一種用于高度并行操縱單分子的方法。AFS單分子聲力譜儀是款商業(yè)化的獨立儀器,包括一個易于操作和測量的智能化專業(yè)顯微鏡。AFS技術(shù)是采用功能強大而成本低廉的芯片裝置,能夠高精度施加力同時對數(shù)千個生物分子進行檢測。
AFS單分子聲力譜儀(聲鑷)原理
AFS技術(shù)由玻璃微流控芯片和透明的壓電變換器構(gòu)成來產(chǎn)生共振聲波。AFS芯片上的聲波(超聲波)可同時并行地在數(shù)千個生物分子(如DNA,RNA或蛋白質(zhì))施加亞皮牛頓(pn)到數(shù)百皮牛頓(pn)的力,同時具有亞毫秒的響應(yīng)時間及固有穩(wěn)定性。
AFS作為一個理想的工具在核酸蛋白、藥物蛋白和抗原抗體層面上破譯分子間相互作用的詳情。AFS技術(shù)能夠使科學(xué)家研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能相互關(guān)系,新的生物機制和細胞力學(xué),也可用于研究和識別自由能圖,動力學(xué)速率和在反應(yīng)過程中的中間態(tài)。
AFS作為一個高度集成化的系統(tǒng),包括倒置光學(xué)顯微鏡與軟件、工作站及相關(guān)電子器件,用戶界面友好,操控方便。
AFS單分子聲力譜儀(聲鑷)主要技術(shù)特點:
微流控芯片實驗室技術(shù)(Lab-on-Chip)
單分子操縱
高度并行
亞毫秒響應(yīng)時間
固有穩(wěn)定性
安全和友好的用戶界面
高性價比
AFS單分子聲力譜儀(聲鑷)的多功能設(shè)計
AFS作為一個高度靈活的單分子檢測儀器,其顯微鏡平臺給用戶定制和個性化需求提供了多重選擇。
通過在200毫米、150毫米、75毫米和50毫米不同鏡筒透鏡安裝距離來改變光學(xué)放大倍數(shù)
可拆卸側(cè)板便于對光學(xué)路徑的簡單調(diào)整
標準25毫米網(wǎng)格便于外部安裝射流功能的組件(如注射泵)
特殊設(shè)計能夠快速簡單連接外部放大器
專用芯片底座能夠使射流和電子連接安全地接到AFS芯片、簡單快速地固定或重新固定
滑動裝置用于準確定位和鎖定物鏡上的樣品
配裝夾具以確保工作臺上流體組件的固定,以便實現(xiàn)多種流動形式,如重力或注射器驅(qū)動的流動
AFS單分子聲力譜儀(聲鑷)的應(yīng)用
應(yīng)用包括:動態(tài)力譜、恒力測試、力-距離曲線、生物聚合物力學(xué)、鍵斷裂、微流變學(xué)、細胞力學(xué)、水凝膠力學(xué)性能
AFS單分子聲力譜儀(聲鑷)高精度力學(xué)及長度測量
AFS是對單個生物分子進行高精度力學(xué)測量的理想工具。我們在此通過對單個DNA分子不同張力程度及使用AFS的跟蹤軟件測量其長度來證明AFS的高測量精度。
本實驗是在被拴在鏈霉親和素包裹的聚苯乙烯微球(直徑4.5μm)上的單個DNA分子(長度8.4 kbps)上進行的。
用測量之前已生成的對照表來跟蹤微球的高度可達納米精度。
測量過程中,我們將驅(qū)動電壓的(正負峰間)幅度從0 Vpp增加到2.1 Vpp,相應(yīng)的聲學(xué)力從0 pN增加到15.8 pN。AFS軟件能實時確定在各種力作用下的DNA長度,以此來探測生物活動,如蛋白質(zhì)-DNA的相互作用。
具有14位垂直分辨率的信號發(fā)生器產(chǎn)生的亞皮牛頓(pN)精度的恒聲學(xué)力具有數(shù)小時的穩(wěn)定性和亞毫秒的響應(yīng)時間。
AFS單分子聲力譜儀(聲鑷)并行測量力學(xué)性能
AFS擁有強大獨特的功能,能夠以高度并行的方式實現(xiàn)單分子的測量。因為在很多情況下由熱擾動引起的復(fù)雜狀態(tài)及隨機的個別狀態(tài)需要在單個實驗中同時測量得到,而AFS并行測量功能恰好實現(xiàn)了此要求,這是非常關(guān)鍵的。在這個單分子的拉力實驗中,通過并行測量得到了20個DNA分子的力學(xué)參數(shù)。
力-拉伸長度曲線
20個獨立DNA分子的并行拉伸曲線。我們將張力從0.1 pN增加到48 pN來記錄力學(xué)-拉伸長度曲線。在一個可視區(qū)里同時并行地獲得曲線。單分子多數(shù)量力學(xué)測量功能,可以應(yīng)用到不同的實驗如蛋白質(zhì)和RNA伸展和核酸酶處理。
高數(shù)據(jù)量的鍵斷裂測量
統(tǒng)計分析和高數(shù)據(jù)量采集對于抗體-抗原相互作用的表征是至關(guān)重要的。由于AFS多數(shù)量分子測試的能力,大量的鍵可以并行測試,大大減少了測量時間。
這個實驗展示了AFS能夠在單個測量實驗中獲取一個完整的251個單分子Dig:: anti-Dig鍵斷裂力分布。
斷裂力柱狀圖
251個 Dig::anti-Dig 鍵,拉伸載荷率為2.3 pN/s,每 Dig::anti-Dig 鍵的斷裂力記錄下來并繪制成一個斷裂力柱狀圖。此柱狀圖在相同條件下的單個實驗中得到,保證實驗的可靠性和重現(xiàn)性。AFS能夠應(yīng)用加載速率跨越幾個數(shù)量級(10-4 PN / s到103 PN / s),使之成為高度并行測量動態(tài)力學(xué)譜的理想工具。
AFS單分子聲力譜儀(聲鑷)規(guī)格參數(shù)
AFS是一個真正的測量單分子的工具,包括一個專用的倒置光學(xué)顯微鏡,射流模塊和電子組件,集成在一個小箱體內(nèi)(300mm×375mm×200mm)。
AFS專用顯微鏡
單色LED照明
波長660 nm
CFI消色差物鏡(可升級)
尼康40x、NA 0.65,WD 0.65mm
校正色差,球面像差,模糊和圖像的平坦性
電動Z軸物鏡臺(可升級)
高性能兩相步進微平移臺,行程范圍5 mm,步長50 nm,亞納米級的穩(wěn)定性
USB 3.0 CMOS攝像頭(可升級)
1280×1024像素(像素大小5.3 μm),1.31兆像素
全視場實時并行測量高達60赫茲
手動XY樣品臺
微米精度20毫米行程范圍
雙燕尾導(dǎo)軌,使用戶能測量樣品內(nèi)不同的位置
配帶有刻度按鈕的細牙螺紋軸
信號發(fā)生器(可升級)
能承受共振聲波達10Vpp(電壓峰峰值,在50Ω阻抗下)
可以實現(xiàn)10-5 赫茲到千赫茲甚至千赫茲以上頻率范圍的不同時間尺度的動態(tài)力學(xué)譜和力的掃描
超越的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性
在14位垂直分辨率下的靜態(tài)和動態(tài)力測量
AFS單分子聲力譜儀(聲鑷)芯片
AFS系統(tǒng)包含三種AFS芯片,每個AFS芯片都會提前校準并且給出芯片的共振頻率
加載速率范圍:10-4 PN / s到103 PN / s
AFS芯片尺寸:45 mm x 15 mm x 1.275 mm
加載力:大于200 pN(4.5μm的聚苯乙烯微球,采用電壓放大器)
全新的AFS芯片設(shè)計
我們將不斷地改進AFS芯片。與AFS用戶密切合作,提高芯片的性能、功能和可用性。
LC310E型
KYKY-EM8010場發(fā)射掃描電子顯微鏡
MHR多效反應(yīng)機