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LSM是世界上**臺真正意義上的高通量全自動斑馬魚顯微操作注射儀,它的誕生完全可以滿足對于高通量胚胎或細胞的注射需求和解放實驗操作人員的雙手,讓顯微注射變得更加簡單,快速,精準!
高通量全自動斑馬魚胚胎顯微注射與傳統技術相比優勢:
1. 高通量,2500個胚胎/小時,全自動無需手工注射
2. 可定量的注射,重復性高,方便對比研究
3. 快速檢測通常需要3 - 7天,而不是使用其他技術的數周時間
4. 精確全自動3D定位,方便快速,可以實現高效的自動成像(兼容共聚焦顯微鏡等)
5. 可培養細胞3D球狀,使用細胞系或原細胞進行培養
6. 可進行腫瘤微環境研究;球狀體可以在預先形成的微晶中引入環境,如與膠原凝膠混合的細胞
7. 可細胞間相互作用的研究,如癌癥和免疫細胞,細菌和免疫細胞
斑馬魚胚胎顯微注射應用領域:
1. 高通量斑馬魚胚胎注射:將瓊脂糖凝膠注入模具形成一個瓊脂網格,該網格用于將斑馬魚的胚胎對齊。注射時,根據實驗所需樣品批量不同,可以選擇不同規格的網格,如: 2580 個, 1024 個, 9 x 100 個。 將胚胎放入模具中只需要不到5分鐘的時間。我們的機器可以在*接近受精卵和卵黃表面處進行注射,從而保證了注射的質量。
2. 3D細胞培養,細胞球類:首先,膠原蛋白,或另一種水凝膠,被吸進一個多孔板,并被允許設置。然后,從細胞培養或初級組織中制備出一種單細胞懸浮體。這種細胞懸浮體與一種惰性聚合物,PVP混合在一起,并被裝入針頭。*后,細胞懸浮在預先確定的位置被注入到水凝膠中。一種典型的檢測方法是培養3-7天,可以使用標準/共焦顯微鏡進行病理處理,或為流式細胞多色分析制樣。可復制的注入位置允許對相同的位置的所有孔進行成像。球體的大小(~300μ,~10k的細胞)和外生長是可復制的,從而成為活性篩查遷移、增殖等的立項選擇。
3. 細胞注射:注射是在精確的位置進行的,因此不同的細胞類型可以被注射到可復制的距離上。這些注射可以在不同的時間進行,以適應不同的生長速度或時間依賴的生物相互作用。許多混合培養分析正在發展中。
斑馬魚胚胎顯微注射文獻鏈接:
Spaink, H. P., et al. Robotic injection of zebrafish embryos for high-throughput screening in disease models. Methods. 62, 246-254
Veneman, W. J., et al. A zebrafish high throughput screening system used for Staphylococcus epidermidis infection marker discovery. BMC Genomics. 14, 255
Meijer, A. H., Spaink, H. P. Host-pathogen interactions made transparent with the zebrafish model.Curr Drug Targets. 12, 1000-1017
Pardo-Martin, C., et al. High-throughput in vivo vertebrate screening. Nature Methods. 7, 634-636
Stoop, E. J. M., et al. Zebrafish embryo screen for mycobacterial genes involved in the initiation of granuloma formation reveals a newly identified ESX-1 component. Disease Model., & Mechanisms. 4, 526-536
Benard, E. L., et al. Infection of zebrafish embryos with intracellular bacterial pathogens. J Vis Exp.