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Qubit 4 熒光計采用專門研制的熒光檢測技術和Invitrogen™ Molecular Probes™ 染料。這些染料熒光只有與特異性的靶分子結合時,才能發射熒光信號,即使有游離核苷酸或降解核酸存在,這些染料仍能發揮作用。Qubit 4 熒光定量即便在低濃度下亦具有目前的DNA 和RNA 定量特異性和靈敏度。
• 選擇性 — Qubit 熒光定量采用Qubit 分析試劑盒,其包括**的染料,只有與DNA、RNA或蛋白質結合時方可發出熒光。由于Qubit 技術只報告靶分子( 而不是雜質) 的濃度,因此這種特異性可以使您獲得十分結果
• 靈敏性 — 低僅需1 uL 樣品,能可靠地定量濃度僅為10pg/L 的DNA 和12.5μg/mL 的蛋白質樣本
• 簡單直觀 — 反應靈敏的5.7 英寸彩色觸摸屏,直觀的導航按鈕
• 迅速 — 全新的雙核處理器,5 秒內快速計算樣品濃度,存儲1000 個結果
• 個性化 — 個性化設置常規應用,可通過MyQubit 軟件和網絡工具創建個性化assay,六國操作語言可供選擇
上市12 年來,Qubit 熒光計一直以其極高的和靈敏性,受到全球上萬個實驗室的青睞。迄今為止,已經有17,500 篇有關Qubit 的文獻引述。推出的Qubit 4 熒光計秉承上一代儀器的高準確性,不僅僅可測量樣品DNA,RNA 和蛋白質含量,還擁有全新的功能,包括:
• 適用全新RNA IQ assay — 快速可靠地檢測RNA 完整性和質量
• 數據導出 — 除U 盤和USB 連接電腦導出數據,還擁有WiFi 功能
• 內置試劑計算器 — 快速計算配置工作溶液所需的染料和緩沖液
Qubit 操作簡單直觀
Qubit RNA IQ Assay
快速、準確地檢測RNA 完整性和質量
RNA 樣品的質量評估對于下游的實驗的成功尤為重要。全新上市的InvitrogenTM Qubit RNA IQ(Integrity & Quality )試劑盒和Qubit 4 熒光計配套使用,只需兩步就可以準確區分完整和降解RNA,快速評估RNA 質量或降解程度。無需特殊的處理步驟,繁雜的樣本制備或漫長的等待過程——*少僅需1 uL,濃度為0.5-1.5 ug/uL 的待測樣品,即可在4 秒內獲得RNA IQ 結果。
Qubit RNA IQ 試劑盒采用兩種獨特的熒光染料——一種與大RNA,完整和/ 或結構RNA 結合,另一種選擇性地結合較小、降解的RNA(圖5),兩種染料結合使用,可快速地評估RNA樣品的完整性和質量。使用時,您只需將樣本加入RNA IQ 工作液,然后在Qubit 4 熒光計上完成檢測。檢測結果會提供RNA 樣品完整性和質量的總數值或RNA IQ#,以及樣本中大小
RNA 的百分比值(圖6)。與其他RNA 質量分數類似,RNAIQ# 評分范圍為1 到10,數值越大,說明RNA 的質量越高,完整性越好。
與電泳法相比,RNA IQ 檢測法有何優勢?
Qubit RNA IQ 為檢測RNA 樣本是否降解提供一種快速簡單的方法。與基于微流體芯片法比較,RNA IQ 法需要的設備便宜,操作簡單,更重要的是檢測所需的時間大大縮短。通常來說,完成12 個樣品的檢測,RNA IQ 法約需要10 分鐘,而使用微流體法,約需要75 分鐘。如果您只是需要簡單評估RNA 樣品是否降解,可以使用RNA IQ 法快速完成檢測,但如果您需要獲取具體的RNA 片段大小及分布信息,我們依然推薦您使用基于凝膠或微流體的電泳方法。
RNA IQ 檢測結果反映樣本中大RNA 和/ 或結構RNA 和小RNA的百分比,其數值與電泳法結果正相關(圖7)。然而,需要注意的是IQ# 值反映的是樣本中大小RNA 的比值,由于計算原
理不同,IQ# 值與其他質量評估方法得到的結果之間存在一些差異(圖8)。對特定樣本或下游應用,我們推薦您開始同時使用RNA IQ 試劑盒和傳統電泳法來確定測量值的相關性。