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ABI 7300型實時熒光定量PCR儀是特異性靶基因檢測與定量的一體化平臺。ABI 7300將PCR熱循環,熒光檢測和各種應用分析軟件結合在一起,可以動態觀察PCR每一循環各反應管中PCR擴增產物逐漸增加的情況。PCR實驗結束后可以馬上得到定量結果,無需凝膠電泳分析,無需純化PCR產物,無需進行任何實驗操作。ABI 7300型實時熒光定量PCR系統采用96孔反應板或單個及8聯管,反應體積25-100微升,實驗可以在不到2小時內結束。與其他人工基因定量分析方法如Northern blotting or RNase-protection assays相比,ABI 7300型實時熒光定量PCR系統具有時間省,靈敏度高,準確性好和線性范圍寬等優點。ABI 7300型實時熒光定量PCR系統由全球實時定量PCR技術的*—美國應用生物系統公司于2004年1月*推出,它質量優異,實驗結果準確可信,性能價格比極其優越。
實時定量PCR的主要應用:
實時定量PCR應用廣泛,包括基于相對定量分析的基因表達分析,以標準曲線為基礎的病原體*定量分析,定性的PCR擴增后核酸序列的SNP基因型分析,以及以陽性內對照為基礎的陽性/陰性結果判定。
實時定量PCR系統分析軟件:
ABI 7300型實時熒光定量PCR系統軟件采用Windows XP®操作系統,進行儀器控制,數據收集和數據分析,軟件功能強大,界面友好,包括如下特色:
• 反應板設置指南,使實驗設計非常簡單,即使是復雜的多重定量實驗也是如此。
• 擴增反應曲線的實時監測
• 自動設定熒光基線,自動計算熒光閾值使實驗結果分析大大簡化
• 采用標準曲線進行靶基因的*定量
• 基因表達相對定量軟件提供強大的結果分析顯示,可以自動將多達10塊96孔板基因表達實驗的數據同時分析,并自動去除無關項數據,該軟件為選購件
• 自動SNP分型軟件以直觀的圖表輸出分型結果并自動進行分型質量評分
• 解離曲線數據采集操作簡單觀察方便,可以在儀器運行時觀察解離曲線數據
• 觀察實時擴增曲線時可以非常方便的標定所對應的樣品孔位置
• 光源使用時間監測及儀器系統自我診斷程序
四色熒光同時檢測支持各種應用需要,包括:基因表達分析,病原體定量,SNP基因分型檢測和采用管內陽性對照的陽性/陰性結果檢測
• 強大而靈活的軟件包括反應板設置指南,更先進的實驗結果顯示與自動分析工具使實驗數據的分析處理更簡單直觀
• 精確的光路設計與超低溫CCD成像和先進的多組分熒光自動分析校正軟件,使實驗結果更準確更可靠,實驗結果的重現性更好
• *型半導體熱循環系統支持96孔板和單一0.2ml反應管
• 體積小使用方便,適用于任何空間的實驗室
熒光信號檢測:
ABI 7300型實時熒光定量PCR系統的全部96個樣品孔同時被鹵鎢燈激發,激發的熒光通過四色光學濾鏡后到達CCD照相機檢測信號。四色濾光片能夠有效地分辨包括
FAM™/SYBR® Green I,VIC™/JOE™,TAMRA™,和ROX™在內的多種熒光染料。多色熒光檢測技術可實現多重定量、SNPs基因型分型和帶有內部陽性對照的陰/陽性分析成為可能。熱循環系統 新型半導體,96個樣品孔
光學系統 單一激發光源,四色熒光濾光片和超低溫CCD成像系統
Run Variables
定量PCR運行時間 2 小時
樣品管類型 96孔板或0.2-mL單管
反應體積 25–100 微升
電腦技術指標:
美國應用生物系統公司為ABI 7300型實時熒光定量PCR系統提供配套的Dell™商用系列電腦(客戶可以選擇手提電腦或臺式電腦.
安裝技術指標:
在使用TaqMan®的RNA合成酶P儀器安裝板的情況下,ABI 7300型實時熒光定量PCR系統能夠區分5,000和10,000模板拷貝數,其置信度高達99.7%
儀器性能:
ABI 7300型實時熒光定量PCR系統經過驗證可以達到如下性能目標:
· 9個數量級的線性范圍
·可以檢測50ul反應體積單一報告熒光TaqMan實驗中僅10個起始拷貝數的模板,其置信度高達99.7%
試劑與消耗品:
ABI 7300型實時熒光定量PCR系統可使用全套定量PCR試劑與消耗品,包括:TaqMan® PCR通用預混試劑, SYBR® Green I預混試劑,96孔反應板及0.2ml反應管
TaqMan® Assays-on-Demand™ and TaqMan® Assays-by-Design™應用試劑盒:
美美國應用生物系統公司為7300型實時熒光定量PCR系統提供各種配套的TaqMan定量PCR應用試劑盒,這些試劑盒均經過嚴格的質量控制,可以拿來直接使用。