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MF 5顯微細胞分析/菌落計數/篩選/抑菌圈測量聯用儀是2017年迅數科技全新升級的高端型號多功能一體機,由菌落、抑菌圈成像系統、顯微成像系統及圖像分析軟件構成的,專為高端科研、檢測需求而設計。
顯微數字成像由德國萊卡DM750三目顯微鏡搭配SONY 全局快門相機,畫面清晰,動態反應超快。 菌落、抑菌圈數字成像由4/3英寸超大面陣CMOS相機與大靶面高清定焦鏡頭搭配,細節表現力好、畫質銳利。
系統還具備數據安全、審計追蹤、信息管理功能,以防篡改技術、測試環境-測試流程的智能重構技術、水印簽章技術為核心,構建多層次、相互制約的安全管理保障體系, 符合國家食品藥品監督管理總局對食品、藥品檢測計算機信息系統的要求。
顯微圖像分析
顯微圖像采集
德國萊卡DM750三目顯微鏡通過C-Mount接口連接全局快門相機(SONY 500萬像素CMOS芯片),清晰展現細胞數字影像,高倍下切換視野,做到動態圖像無拖影,瞬間凝固游動細胞畫面。
顯微測量功能
可以精確測量顆粒的直徑、角度、弧度、周長、面積,以及手動繪制的任意直線、弧線、曲線的長度等,并自動生成測量結果。
圖像處理與標注
內置27種圖像處理方法,如自適應增強、彩色分量增強、圖像平整、邊緣銳化、濾波、邊緣檢測、形態學運算等,可顯著提高顯微觀察效果,滿足高端用戶的特殊需求。文字和圖形嵌入工具,為科研論文的寫作提供幫助。
顆粒自動統計
具備大量統計功能,可對顆粒、細胞進行快速計數,如區域統計、直徑分類統計、顏色識別統計、粘連分割、雜質剔除、鼠標點擊統計等。
菌落計數
培養皿成像系統
采用松下4/3英寸超大芯片CMOS相機,具有視野面積廣、像素高、圖像細節清晰的特點。結合16mm大靶面高清定焦鏡頭和懸浮式暗示野照明,可清晰展現培養基深層的細小菌落、氣泡、劃痕。
全封閉暗箱拍攝
采用全封閉、寬光帶照明技術,符合人體工學的舷窗門設計,隔絕環境光的干擾,徹底消除雜散光在玻璃培養皿折射形成的光斑、光環現象,為精確活菌計數提供了必備的光影條件。上光源呈360度柔性混合光照明,可突顯菌落的色澤和紋理,使菌落表面的皺折、凹陷、邊緣的鋸齒更富立體感;下光源為晶銳懸浮式暗視野照明,不僅清晰勾勒菌落輪廓,還能把霉菌或放線菌的基內菌絲與氣生菌絲部分明顯區分。
三色LED混合光源、色溫調節
科學研究希望能真實反應菌落的色澤,傳統白光LED照明成像偏藍。長壽命、低功耗、環保型三色LED混合光,通過暖色光和冷色光的配比,控制色溫范圍為3500K-8500k,拍攝出*真實的菌落色澤。
輔助光源--紫外
內置254nm紫外燈,可解決菌落儀長期使用帶來的污染問題,也能滿足紫外誘變的需要。
疑難圖像處理--高級統計算法
菌落計數的核心是將菌落從培養基背景中分割提取出來,迅數第四代菌落計數儀采用目前國際前沿的圖像分割技術---基于水平集活動輪廓模型的圖像分割方法。該方法具有抗噪性強、數值求解穩定性好、分割邊界光滑連續、可以處理拓撲結構等優點。針對微生物菌落多樣性,迅數開發出了“快速活動輪廓模型”、“基于RGB約束的彩色水平集活動輪廓模型”、“多相水平集活動輪廓模型”等先進的圖像分割技術,實現了復雜菌落、高難度平皿的準確計數。
免疫學分析--OPKA、SBA
在免疫學檢測方法中,調理吞噬殺菌試驗(OPKA)和血清殺菌試驗(SBA)需要對同一平皿內多區域或微孔板不同孔內培養的細菌進行計數,迅數-多區域統計算法可以輕松實現任意多個區域的同步一鍵計數。
多孔板克隆計數
克隆形成實驗中的細胞克隆計數一般是采用手動計數的方式,然而手動計數過程中帶有非常大的不確定性,特別是當形成的細胞克隆大小差異較大時,很難得到更有效、精確的數據。迅數科技為克隆形成實驗提供了一項快速方便的多區域統計工具,可以通過智能識別細胞克隆的形態和顏色,實現精確計數。
網格濾膜與3M測試片
在3M測試片或濾膜上進行菌落統計時,傳統圖像處理方法分割出來的是網格而不是菌落。迅數創新推出的“基于形態約束的水平集活動輪廓模型”分割算法,可實現網格背景下的一鍵菌落計數。
高級工具-背景文字、斑紋消除
培養皿底部用記號筆標的符號、未清洗徹底留下的污漬斑痕,都會給菌落影像自動識別帶來干擾。迅數開發的背景修復工具,只需兩步操作,即可把培養皿影像修復到原始狀態,從而提高菌落圖像分割的精度。
菌落篩選
雙圈分析
迅數為抑菌圈、透明圈、變色圈、生長圈等雙圈問題提供了專門的特性分析工具,通過精確測量外圈直徑和菌落直徑,自動計算二者面積比和直徑比。根據比值的大小自動排序,定位出相應的菌落,可用于抗生素、酶制劑、有機酸等的篩選。
多菌種分類識別
微生物研究中有時需要在多菌混雜情況下把目標菌分類統計出來。例圖為地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌混合益生菌制劑,利用兩種菌在顏色、大小、輪廓的微小特征差異,準確地進行圖像識別。
彩色菌落識別
隨著顯色培養基的使用日益廣泛,在科研、檢測領域又提出了新的要求:對不同顏色的菌落一次性分類計數。傳統的多色菌落自動分類一般采用彩色立方體的方法,但效果往往不好。迅數科技**研究的“基于RGB約束的水平集活動輪廓模型多色聚類”,將RGB模型加入CV水平集活動輪廓模型的約束條件中,得到了較理想的圖像分割效果。
菌落特征描述
微生物基礎研究中菌落形態描述是必不可少的,由于每個人的語言表述不同,傳統的描述方式隨意性大。迅數建立了一套菌落形態數字化描述體系,不僅規范了細菌、酵母、放線菌、霉菌的特征描述,還把菌落精確測量數據直接導入數據庫。尤其是菌落顏色,根據取值點的三維顏色數據,自動生成顏色文字描述。
霉菌一鍵式測量
傳統的菌絲生長速率、霉菌生長量、菌絲生長抑制率、室內毒力測定等霉菌研究實驗采用十字交叉法測量菌落生長直徑。由于多數霉菌菌落蔓延、疏松、邊緣發散不規則,測量的人為誤差大,效率低。迅數“霉菌一鍵測量”模塊,只需用“魔棒”在菌落邊緣點擊一次,即可瞬間測出大霉菌的面積、周長、長徑、短徑。
保證系統安全、數據安全的架構設計
“系統管理員、數據管理員、操作員、復核員”四重系統架構,分設職能與權限,確保數據信息的安全、完整和真實。
系統管理員:負責創建、管理所 有操作員與審核員的賬戶和登入密碼。
數據管理員:負責全部測試數據的檔案管理、封存、以及計算機的數據庫管理。
操作員:負責培養皿菌落的測試、自檢、修正、形成電子報告、遞交審核、對審核通過后的文件進行報告打印
審核員:負責對操作員遞交的測試報告進行審核。
水印簽章、防篡改、測試流程智能重構--實現有效的審計追蹤
多用戶密碼登入、電子簽名、操作審核日期計算機生成;
全部操作流程,如圖片、稀釋度、統計工具、所用參數、測試值、修正情況等,由計算機自動記錄在數據庫中,操作員無法進行改動;
通過測試環境和流程的重現,復核員可以追溯操作員的全部操作。
抑菌圈測量
Szone 多模式測量技術
管碟擴散法要求抑菌圈圓而邊緣清晰,但實驗中仍會出現抑菌圈邊緣不清晰、破裂等情況,迅數Szone 抑菌圈多模式測量技術,運用三種不同的高速算法,精確提取構成抑菌圈邊緣的像素點,從而完成高精測量。
抗生素效價測定
符合中國藥典2015版二劑量法、三劑量法及合并計算要求。高清晰成像、高精度數字測量保證了效價測定精度。重復性自檢的相對誤差小于0.01%;均勻性自檢的相對誤差小于0.1%;效價測量精度大于99.7%。
舒巴坦敏感β-內酰胺酶檢驗
抗生素殘留問題成為影響乳制品安全的重要因素之一。為了測試牛奶中是否添加β-內酰胺酶,迅數提供了一款快速測量和智能判斷軟件,通過純水驗證、平行樣本檢測、平均值計算,智能判別β-內酰胺酶陽性或陰性。
主要功能與技術指標
一、菌落、抑菌圈數字成像
1.光源
· 可見光:高亮三色LED結構光
· 254nm紫外:用于腔體消毒、紫外誘變
2.光路與照明控制
· 全封閉暗箱:消除環境雜散光干擾
· 上光源:場景式360°柔性無影光照明
· 下光源:晶銳懸浮式暗視野照明
· 上光、下光、雙光、紫外,自由切換
· 色溫可調(3500K-8500K)、光強可調
3.光電轉換
· 高清工業定焦鏡頭:16mm大靶面 高清定焦鏡頭 ,分辨率150 lp/mm
· 超大芯片CMOS相機:4/3”英寸彩色CMOS 傳感器、1600萬像素、C-Mount
二、菌落分析模塊
1.基本菌落計數功能
· 平皿類型:傾注、涂布、膜濾、螺旋平皿、3M紙片、多孔板
· 一鍵智能計數(6模式):平面感模式、立體感模式、小菌落優先、大菌落優先、同色菌優先、培養基剔除模式
· 全皿菌落統計:菌落總數統計,并按25檔尺寸分類顯示
· 區域選擇統計:可選擇圓形、矩形、任意圈定區域進行統計
· 直徑分類統計:設置直徑范圍,統計特定大小的菌落
· 鼠標點擊統計:快速標記、添加菌落,適合培養皿邊緣菌落的計數
· 菌落粘連分割:自動分割相互粘連的菌落,鏈狀菌落由用戶選擇分割或不分割
2.高級菌落統計功能
· 螺旋菌落統計:螺旋菌落統計:根據FDA標準自動計數螺旋平板,支持指數模式、緩慢指數模式、均一模式、比例模式、草坪模式等。兼容美國SBI、西班牙IUL螺旋接種儀。支持出入境檢驗檢疫行業標準 SN/T 2098-2008
· 動態調節統計:可對統計結果進行動態調節修正,快速獲取**統計效果。
· 偏差預估統計:適用于菌落顏色多且復雜的情況。
· 水平集多模型算法:搜索運算,獲取**圖像分割效果,適應培養基背景變換
· 特定菌落統計:根據菌落色澤、大小、輪廓特征,識別特定菌落
· 反式統計:適合菌落類型極其復雜而培養基背景均勻
· 高粘連菌統計:適合多重粘連菌的分割計算
· 雜菌、雜質剔除:根據形態、尺寸、顏色的區別,進行自動雜菌、雜質剔除
3.網格濾膜與3M測試片
· 黑色實線網格一鍵統計
· 3M細菌總數測試片、3M金黃色葡萄球菌測試片:一鍵統計
· 3M大腸菌群測試片、3M大腸桿菌/大腸菌群快速測試片:一鍵統計+人工選擇
4.典型菌篩選
· 單色分類統計:根據顏色精度、擴散度和菌落大小、輪廓特征,篩選特定菌落
· 多色自動聚類:根據顏色聚類精度,自動區分24種不同顏色的菌落
· 指定多色篩選:一次篩選1-8種指定顏色菌落
· 透明圈特性分析:適用于抑菌圈、水解圈、變色圈、溶鈣圈、溶血圈、排油圈、溶磷圈分析
· 雙色圈自動篩選
5.菌落特征描述
· 細菌、酵母:顏色、大小、形狀、表面形態、邊緣、光澤、透明度等特征,智能描述和排序
· 霉菌、放線菌:正面顏色、反面顏色、大小、表面形態、邊緣、質地等特征,智能描述和排序
6.微生物限度分析工具
· 培養基適用性檢查(適應中國藥典2015版)
· 控制菌檢查-菌落形態
7.專線分析
· 防霉檢測:定量分析防霉等級
· 串聯統計:適合培養基背景不均勻的復雜菌落
· 并聯統計:適合多孔板、OPKA、SBA分析
8.高級工具
· 網格清除:消除濾膜網格背景干擾
· 人工計數修正:添加或刪除菌落
· 排除污染區域:鼠標勾勒任意污染區域,自動剔除污染區域的菌落數
· 背景文字消除:自動消除記號筆干擾
· 背景斑紋去除:自動消除培養皿污漬干擾
· 人工粘連分割:手動分割多重粘連菌落
· 參數自動換算:培養皿直徑、樣本稀釋度輸入,實現自動換算
· 文字、圖形標注:各類繪圖工具和中英文文字嵌入
9.標定與測量
· 儀器標定:儀器自帶標定、人工修正標定
· 一鍵式快速測量:一鍵測定大菌落,適合真菌、放線菌的單菌落分析
· 全皿自動測量:全皿菌落的等效直徑、面積、長短徑、周長、圓度分析
· 手動精確測量:長度、角度、弧度、面積、弧線、任意曲線
10.圖像處理
· 圖像調節:灰度圖、負相圖轉換;亮度、對比度、飽和度調節;RGB調節
· 圖像增強:銳化、自適應增強
· 圖像濾波:中值濾波、高通濾波、高斯濾波、低通濾波、隊列濾波、高通高斯
· 邊緣檢測:Sobel算子、Robert算子、Laplace算子、垂直檢測、水平檢測
· 形態學運算:腐蝕、膨脹、開運算、閉運算
三、數據安全與管理
1.“系統、數據、操作、復核”四重系統架構,分設職能與權限,確保數據信息的安全、完整和真實
· 系統管理員(**層):負責創建、管理所有操作員與審核員的賬戶和登入密碼。確保操作員與操作員之間、操作員與審核員之間的賬戶隔離與數據隔離。
· 數據管理員(副高層):負責全部測試數據的檔案管理、以及計算機的數據庫管理。封存所有審核通過的測試報告或將原始圖片、測試數據備份、導出,保證了數據的完整性、安全性。
· 操作員:負責培養皿菌落的測試、自檢、修正、形成電子報告、遞交審核、對審核通過后的文件進行報告打印。
· 復核員:負責對操作員遞交的測試報告進行審核。核查數據輸入與處理過程,但無權修改;對存疑報告作“審核退回”處理,要求操作員重新測試;對“審核通過”的報告將**性存檔,無論審核員還是操作員都無權再刪除,以確保數據的原始性和真實性。
2.數據存儲與導出
· 以電子數據為主,記錄:樣本來源、編號、稀釋度、平皿圖片、識別效果、計數值、所用統計工具、參數設置、修正情況,確保記錄信息完整。
· 滿足質量審計,存儲的電子數據能以PDF或Excell格式打印輸出
3.水印簽章技術、防篡改技術、測試流程智能重構技術,實現有效的審計追蹤
4.防篡改技術
· 采用多用戶登入管理,所有操作員、審核員的名字,被系統自動記錄在操作流程和測試報告中;所有操作日期、審核日期,由計算機自動生成,避免錯填或偽造。
· 全部操作流程,包括:菌落圖片、培養皿尺寸、樣本稀釋度、統計工具、所用參數、測試所得的菌落總數、自檢修正后的菌落總數等,由計算機自動記錄在數據庫中,操作員無法進行改動,為后續審計提供全部真實數據。
5.水印簽章技術
· “審核通過”的測試報告會自動生成操作員和審核員的賬戶電子簽名,并在報告上加印防偽的“審核通過”水印簽章。
6.測試流程的智能重構技術
· “復核員”打開“等待審核”的測試記錄,計算機自動復原操作員的全部流程和測試環境,包括:當時所測的培養皿圖片、測試結果、培養皿尺寸、樣本稀釋度、采用的統計工具及所用參數、測試所得的菌落總數、修正情況……
· 通過測試環境和測試流程的重現,復核員可以追溯操作員的全部操作,復核測試結果的準確性,達到審計追蹤目的。
四、抑菌圈分析模塊
1.Szone 抑菌圈多模式測量技術
· 自動檢測:基于抑菌圈輪廓的精確邊緣檢測,適合邊緣清晰、圓形抑菌圈
· 擬圓逼近:基于抑菌圈輪廓的圓形擬合逼近,適合邊緣破裂、非標準圓形抑菌圈
· 人工檢測:鼠標點擊抑菌圈邊緣上三點成圓,適合邊緣模糊的抑菌圈
2.抗生素效價測定
· 一劑量法效價檢測:適合美國藥典
· 二劑量法、三劑量法及合并計算:適合中國藥典2015版
· 重復性自檢:相對誤差≤0.01%、重復測量精度 ≤0.002mm
· 均勻性自檢:相對誤差≤0.1%
· 臺間測量差異≤0.2%
3.舒巴坦敏感β-內酰胺酶檢驗
· 純水驗證:根據(A)、(B)、(D)產生抑菌圈,D-C≧3, B-A≦3 ,判定系統成立
· 自動檢測三個平行樣本的(A)、(B)、(C)、(D)抑菌圈,并數據導入
· 自動計算平行試驗平均值,智能判別結果的陰陽性。
· 無效報告自動預警
五、顯微細胞分析模塊
1.顯微成像
· 顯微鏡:萊卡DM750顯微鏡
· 全局快門相機:SONY 2/3”英寸CMOS芯片,500萬像素,35fps
2.圖像顯示、轉換
· 圖像顯示:實時動態觀察,隨時捕捉任意視野圖像
· 圖像觀察:具有旋轉、放大、縮小、鏡像轉換、局部觀察功能
· 圖像編輯:具有對圖像任意區域剪切、復制、粘貼及文字輸入等功能
3.顯微圖像處理
· 自適應增強:通過對原圖像進行與其特征匹配的分辨增強處理,使圖像更清晰,邊緣更明顯,以便進行圖像細微結構的觀察與識別。
· 圖像調整:圖像亮度、對比度、飽和度、RGB三色任意調節,灰度圖、負相圖的轉換
· 圖像補償:通過線性補償,對數補償,貝爾補償等多種數學方法對圖像的失真部分進行補償,使圖像更加清晰。
· 圖像銳化:通過增強圖像的高頻分量,使圖像邊緣變得更清晰。
· 圖像平整:通過圖像平整處理,使圖像背景均勻。
· 圖像濾波:高斯濾波、低通濾波、中值濾波等6種濾波方式有效提高圖像清晰度。
· 邊緣檢測:兩種檢測方式、三種算子結合多種檢測選項更精確地提取圖像輪廓。
· 形態學處理:腐蝕、膨脹、開啟、閉合等非線性數學形態學處理。
4.目標測量
· 標 定:具有對系統在線標定功能,實現精確測量(系統內置默認標定值)
· 測量功能:對顆粒直徑、長度、弧度、角度、任意曲線、面積等的在線測量
5.顆粒統計
· 自動統計:自動顆粒計數,并顯示每個顆粒的面積、周長、直徑、圓度等形態參數
· 區域統計:可選擇長方形、圓形、傘形等任意形狀區域進行統計
· 直徑分類統計:設置直徑范圍,統計特定大小的顆粒
· 顏色識別統計:根據色度、亮度、飽和度篩選特定顆粒
· 鼠標點擊統計:鼠標點擊添加或刪除顆粒,方便、快捷
· 粘連分割處理:根據用戶需求可自動或手動分割相互粘連的顆粒
· 多種統計算法:采用多種分割算法,適合不同背景的顆粒統計
· 多樣本統計:對多張顯微圖像的綜合統計
· 參數自動換算:根據統計區域面積、樣本稀釋度,實現自動換算
6.繪圖與標注
· 繪圖:對打開的圖像可根據需要,繪制直線、矩形、圓形、以及任意曲線
· 文字編輯:對打開的圖像進行文字編輯
· 標注:可方便的進行直線和角度的標注
六、儀器規格與配置
· MF5 多功能一體機主機
· 萊卡DM750顯微鏡、攝像轉接口
· 顯微鏡攝像頭
· 菌落分析軟件、自動抑菌圈測量軟件、抗生素效價測定軟件、舒巴坦敏感β-內酰胺酶檢驗軟件、顯微分析軟件
· 高端一體電腦:雙核四線程CPU/4G內存/1T硬盤/21.5"高清屏,Windows 7系統以上