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香港友誠生物科技有限公司
美國
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430
美國**BTX是專業的細胞融合、多功能細胞電穿孔儀 的生產廠家。自從1983年起，苛求的科研工作者就已經把BTX多功能細胞電穿孔儀作為電融合、電穿孔等應用領域的**儀器。ECM多功能細胞電穿孔儀在轉基因的應用領域中得以廣泛的應用，其無以倫比的高性能得到了全球同行的厚愛。BTX的多功能細胞電穿孔儀系列產品適用于動植物、細菌、酵母、哺乳動物、人類細胞（包括活體細胞）的轉基因等操作，
BTX還在網站建立了技術數據庫，提供超過5000份的參考目錄和600多份的protocols供科研工作者免費查閱。
多功能細胞電穿孔儀應用舉例
•動物細胞轉染（系統：ECM630/830）
對真核細胞的轉染可以通過多種方法獲得，例如磷酸鈣沉淀、脂質體轉染、病毒方法以及電穿孔。電穿孔已經被正式對傳統的轉染方法不靈的細胞有很好的效果，因此被選為**的分子傳遞系統。電穿孔的好處有可重復性、更高的效率、大量樣本處理、無毒性以及容易使用（不需要孵育時間）。
Lofin等人（1999）對NIH/3T3細胞進行電穿孔使mRNA進入，以研究細胞周期及細胞分化過程中mRNA對基因表達調節、控制。Bodwell等人（1999）在對COS-7細胞進行電穿孔是使用較長的脈沖時間后獲得了較高水平的表達。Warner等人（1997）使用電穿孔方法成功轉化了淋巴細胞。Incyte Genomics公司成功使用BTX電穿孔儀轉染了ES細胞進行轉基因小鼠的生產。BTX ECM399\630\830型儀器、電穿孔杯以及多種特用的電極都用于動物細胞轉染用途。
•蛋白質電整合/電插入 （系統：ECM630/830）
將蛋白質導入細胞以及將蛋白質插入至細胞膜中也可以通過電穿孔來實現。不光肽段，而且包括抗體的多種蛋白，也可以進行導入。Ushio-Fukai等人（1998）對電穿孔插入哺乳動物細胞中的外源蛋白進行了定量。對于這些用途可以使用多種BTX電極。
•植物細胞轉化（系統：ECM630/830）
對植物原生質（玉米、煙草等）及完整植物的電穿孔可以用于產生對農業/園藝有用的轉基因作物。植物細胞轉化的一個主要目的是對植物細胞進行穩定轉化以產生具有優良品質及產量增加的作物。Lin等人（1997）優化了多種植物上用于GUS表達的電穿孔條件，結果顯示完整植物細胞以及原生質都可以進行有效轉化。Diaz等人（1994）針對小麥及燕麥的葉和根的原生質進行了相似的優化試驗，證明了電穿孔對于植物工作的有效性。這些作者也比較了電穿孔與PEG的差別，結果發現電穿孔更有效、更有重復性、更經濟。BTX是世界上體內轉染用特殊電極的**者。對于這些用途可以使用多種BTX電極，例如2針陣列、游標尺電極、以及Tweezertrodes。
•貼壁細胞的轉染----ACT （系統：ECM630/830）
除了對盛在普通樣品杯的懸浮細胞進行電穿孔外，還可以對多種培養板上的貼壁細胞進行原位電穿孔。這樣可以避免用胰酶消化細胞，有助于保持細胞的活性及細胞數目。Lewis等人（1999）使用培養皿電極將基因轉染入人類及靜脈內皮細胞。Paptis等人（1998）通過對長在導電載玻片的NIH/3T3細胞進行原位電穿孔研究信號轉導。Teruel等人（1999）也對位于載玻片上的海馬神經細胞轉入DNA、RNA以及多種大分子。BTX為貼壁細胞的轉染（ACT）提供了PP35-2、366、747、840及Epizap電極系統。請關注不久后為這些用途開發的新產品
•高通量篩檢----HTS （系統：ECM630/830）
高通量篩檢及cDNA文庫的建立，需要一次處理多個樣本的能力。使用傳統樣品杯花費很大而且有時間限制。然而，96孔板里使用的電極對于這些類型的應用肯定有用。Hoffma-Tsay等人（1994）使用96孔共軸電極在植物融合實驗中檢測8種化學物質。Peterfy等人（1995）比較了多種類型的多孔電極，將DNA傳遞入COS-7細胞。Marrero等人（1997）使用多孔電極將抗體電導入血管平滑肌細胞，以誘導細胞增值。BTX目前提供747和840用于這樣的用途，并且不斷開發新的產品。
體內基因導入（IVGD）（系統：ECM830）
在體內基因轉移的非病毒技術中，直接將質粒DNA注射進入肌肉內是簡單、廉價及安全的。Aihara及Miyazaki（1998）**次指出通過在肌肉內將DNA注射與電穿孔相結合，可以將表達增強100倍。
Mir等人（1999）使用多種類型的電極將基因傳遞進入多種種屬的骨骼肌（大鼠、小鼠、兔、猴）。他們的結果顯示通過使用電穿孔以及DNA注射：（1）基因轉移的效率大大增加了，只是表達增強2-4倍；（2）不同實驗之間的差別縮小了，而這正是單獨DNA注射的主要缺點；（3）表達持續時間很長（數月），這對于長期臨床應用非常重要；（4）不同種屬的不同的肌肉都有陽性的反應，說明廣泛的可用性；（5）基因表達非常特異僅在局部，而周圍組織則沒有影響到。這種技術成功用于其他組織，例如肝、睪丸、以及皮膚。
*近Vicat等人（1999）通過體內電穿孔儀將基因傳遞如小鼠腦組織。與被稱為有力的腦組織基因轉移的非病毒載體的pCMV-luc與PolyEthylenlmine聯合的方法相比，電穿孔的效率要高50倍。Nishi等人證明使用電穿孔可以獲得有效的神經膠質瘤基因轉移。Nishi還顯示對實體瘤進行電基因治療后腫瘤生長阻滯了50-90%。Dean等人將基因電導入完整的腸系膜動脈獲得了成功。電穿孔已經被證實確實是進行體基因/藥物轉移方面一項有前途的技術，有許多新奇的用途。BTX公司特制的2針陣列電極、Genetrodes、卡鉗電極、Tweezertrodes提供將基因侵入性以及侵入性轉移入組織的方法。
卵內基因轉移（IOGD） （系統：ECM830）
Muramatsu等人（1997）比較了3種轉染方法用于將外源基因轉入早期雞胚進行表達。他發現與脂質體轉染及基因槍相比，電穿孔是***的方法。Takeuchi等人（1999）使用電穿孔技術將早期雞胚轉染了tbx5及tbx4基因，以確定肢芽的翅/腿標志。
對于這種用途已經開發出特用的電極。Genetrodes、L形狀針電極，被用于測定雞胚及靶向組織的特定區域。許多研究人員已經轉染了眼、心或者肢體組織，方便了發育生物學方法的進一步研究。剛上市的足控開關具有遙控功能，是ECM830可以在不需要手操作的情況下進行激活，這對于卵內、體內以及體外胚胎用途非常重要。
體外胚胎基因轉移（IVEGD）（系統：ECM830）
Tasaki等人（1999）討論了使用電穿孔在體外小鼠胚胎方面的運用。小鼠胚胎有柱狀的結構而且有比家禽更多胚胎培養基操作需求。有可能對胚胎進行電穿孔用于異位表達研究。在小鼠中后腦部的基因表達已經被觀察。這個技術也用在交配后9.5天小鼠胚胎，以研究Hu基因在神經分化中的功能。BTX為這些目的提供一種全新的電極：Genepaddles。
•胚胎操作/核移植/動物克隆 （系統：ECM2001/830）
核移植是將細胞核從供體轉入受體的過程。細胞核指導胚胎的發育，導致新生體安全出生。在這個過程中，電融合用于將供體細胞與受體卵細胞融合，并進一步激活細胞分裂，形成胚胎。Meng等人（1997）將核移植技術擴展至靈長類動物模型，克隆出恒河猴。技術的進步使研究人員能夠從分裂球進展至更高分化的胚胎細胞以及靜止的胚兒細胞，作為核的供應來源。胚胎產生的細胞在體外培養6-13代，然后在轉入前使用血清饑餓的方法使細胞靜止。如前文所述，Roble、Cibelli以及Stice是**次在1998年報告使用非老化胚成纖維細胞作為核的供體進行核移植而產生綿羊克隆轉基因牛的人。Ian Wilmut在1996年震驚了整個世界，他從成年乳腺的細胞產生出**個動物克隆——多利。使用分化的成年細胞進行克隆的能力打開了核移植廣泛運用的大門即基因治療的令人激動的模式。*近的成功事例PPL Therapeutics公司從成年體細胞克隆出豬。對于這些用途可以使用多種細胞融合樣品池及微型載玻片。
