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Western Blot 屬于經(jīng)驗依賴性的多步驟實驗,結(jié)果的優(yōu)劣受到多個因素的影響,傳統(tǒng)的手工操作容易引入誤差,
難以保證重復(fù)性。BlotCyclerTM 是全自動化的Western Blot 洗液工作站,自動化完成封閉、孵育、清洗和一抗回收的
一系列工作,很好地解放您的勞動力。
更為重要和有意義的是:**的流體清洗可以減少二抗在膜上的附著,降低背景,提高信噪比和相對靈敏度;
自動化的操作流程避免了手工操作的誤差,保證了批次內(nèi)和批次間實驗的重復(fù)性;高通量操作和多條件的設(shè)定
可以輔助您優(yōu)化Western Blot 實驗的條件,例如合適的抗體濃度。
簡易的操作步驟
加入洗滌緩沖液,和6種不同一抗和二抗 | 放置好一抗回收管將轉(zhuǎn)印膜放入樣品盤并加入封閉液 |
編輯程序并運行
自動化操作,可以獲得更好的重復(fù)性
自動化的過程相對于手工操作可以把誤差降至*低,保證了重復(fù)性。
如上圖所示,使用BlotCyclerTM 平行處理5 張膜,檢測Tubulin 和IL-2蛋白,條帶信號使用分子量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行均一化處理,
目的條帶的相對信號值在5 次實驗中的偏差較小。由此可見,BlotCyclerTM 的自動化操作能夠保證較好的重復(fù)性
**的流體技術(shù)降低背景,提高信噪比和相對靈敏度
通過一系列對比實驗發(fā)現(xiàn),使用BlotCyclerTM 進(jìn)行Western Blot 可以獲得更低的背景值,目的蛋白質(zhì)條帶更加清晰銳利。
如上圖所示,泳道1、2、3 分別上樣Hela 細(xì)胞的裂解液、重組的人IL-2 蛋白和前兩者的混合物,加入小鼠源Tubulin
和兔源IL-2 的一抗,以及DyLight549 標(biāo)記的抗鼠二抗和DyLight649 標(biāo)記的抗兔二抗。
設(shè)立4 組平行實驗:BlotCyclerTM 4℃環(huán)境操作,手工4℃環(huán)境操作,BlotCyclerTM 室溫環(huán)境操作,手工室溫環(huán)境操作,
膜信號檢測使用相應(yīng)的熒光成像設(shè)備。不同組內(nèi)蛋白條帶的信號通過分子量標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行均一化處理。
結(jié)果發(fā)現(xiàn),使用BlotCyclerTM 操作所獲得的IL-2 和Tubulin 的相對信號值均高于手工操作,不論是4℃還是室溫環(huán)境。
由此可見,BlotCyclerTM 的自動化操作確實能夠降低背景值,提高信噪比和相對靈敏度。
豐富的程序編寫功能,人性化的設(shè)計理念。
靈活設(shè)定封閉、孵育和洗滌的時間,以及洗滌的循環(huán)數(shù)。 左右兩側(cè)的樣品盤可以設(shè)定不同的程序,獨立控制。
BlotCycler 特點總結(jié)
? 完全自動化:填充試劑后無需人工操作;
? **的流體技術(shù)驅(qū)動液體,無需真空泵或空氣壓縮機(jī)等輔助設(shè)備;
? 通量靈活:6 個樣品盤(每側(cè)3 個),每個樣品盤可使用不同的一抗/ 二抗,*多可一次處理12 張膜;
? 可選配不同大小的樣品盤:10 × 8 cm,15 × 10 cm;
? 自動回收一抗,可以反復(fù)使用10 次;
? 程序結(jié)束后可自動完成管路清洗,去除殘余試劑;
? 觸摸屏程序編寫,可設(shè)定多至100 個步驟,每個步驟的參數(shù)可調(diào);
? 洗滌緩沖液可保留在樣品盤內(nèi),保持膜的濕潤;
? 開放的系統(tǒng)設(shè)計,無需專用的試劑耗材;
? 關(guān)鍵步驟和程序結(jié)束具有聲音提示功能;
? 結(jié)構(gòu)緊湊,占用空間小,僅30.48 × 30.48 cm。
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