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NEURAL ACTIVITY ASSAY 神經網絡功能實時檢測攻略 ◆ ◆ ◆ ◆ PART I 原理介紹 為什么要檢測神經電活動? 研究證明構建體外神經元疾病模型是研究神經元功能和神經系統復雜疾病的一個有效策略。細胞成像、基因表達分析或者蛋白印跡這些方法能夠全面地反應神經疾病模型的復雜性嗎?神經網絡功能又是怎樣的?科學家們很難得到一個完整的答案。而使用Maestro MEA技術,任何科學家都能夠快速簡單地高通量檢測活細胞的網絡電活動。
什么是高通量微電極陣列? Axion的MEA板底部緊密嵌合了呈網格狀的電極陣列。科學家們可以在電極上貼附培養神經元等可興奮性細胞,它們會逐漸成熟并形成網絡,并*終生成網絡功能。這樣MEA板上每個電極就都可以捕捉到毫秒級的神經元自發放電,為您在時間和空間兩個維度提供精準的實驗數據。您還可以通過電刺激或者光刺激進一步拓展實驗設計。 適用樣本 原代神經元細胞,iPSC衍生神經元,腦片,iPSC衍生神經球/類器官/迷你大腦 三個層面了解神經網絡功能 神經細胞(橙色)經培養覆蓋于固定在MEA板底部的電極(灰色)上。Maestro MEA系統檢測神經網絡的功能,包括電活動、同步性和網絡震蕩。
Activity 電活動 如何判斷神經元有沒有功能?動作電位是一個重要標志。動作電位發放頻率高表明其放電頻繁;發放頻率低意味著神經元電生理功能可能已受損。 Synchrony 同步性 如何評判神經元間突觸的功能?突觸的存在使得神經元之間的聯系成為可能。一個神經元的動作電位藉此得以影響到另一個神經元發放的可能性。同步性檢測能夠反映出突觸連接的強弱,及不同的神經元在毫秒級別時間范圍內產生同步放電的可能。 Oscillation 網絡震蕩 如何確定樣本的網絡功能?有功能的神經網絡是由興奮性和抑制性神經元共同構成的。它的一個重要特征就是神經震蕩,即不斷變化中的神經活動高潮-低谷周期。而一個MEA孔內檢測到的所有神經元電發放在時間軸上的規律就是該樣本的震蕩數據。 PART II Maestro系統介紹 Maestro MEA實驗流程 Maestro使得MEA實驗簡單到超乎想象。僅需三步: A 將神經元培養在Axion MEA板上。 B 將MEA板放入Maestro MEA系統,靜待環境倉達到溫度和氣體濃度的平衡。 C 使用AxIS Navigator軟件無創且實時地從三個層面(電活動、突觸功能、網絡震蕩)定量分析神經元電活動。配套的其他分析軟件,還能自動計算出多于25種類別的二級參數,供您進行數據深度挖掘。 Maestro平臺優勢 提供關鍵答案 與常規方法間接檢測可興奮性不同,Maestro MEA系統的測試直接反映神經元的動作電位。比較常見的間接技術如鈣成像,無法捕獲微小卻重要的神經網絡信號變化。而蛋白表達水平的檢測結果與細胞疾病模型功能的相關性也很差。只有使用Maestro MEA系統實時追蹤細胞的可興奮性,您才能回答這個關鍵問題:樣本是否在以您期待的方式放電? 無標記分析 Maestro MEA系統無創地檢測神經元群落的電信號,杜絕使用染料或報告子,避免其對細胞模型的干擾,您數據的準確性無需置疑。更使您得以實現對一個樣本電活動的長期(數小時、數周甚至數月)追蹤。 原位檢測 其它的高通量平臺(例如自動化膜片鉗或者流式細胞儀)通常會要求對樣本做預處理,制備成單細胞懸液再上機檢測。對于可興奮性細胞這種以互相交聯的功能性網絡形式存在的樣本來說,這是一種非常不理想的狀態。此外,細胞收集的過程也需要大量的手動操作步驟。只有Maestro MEA系統能夠在捕獲神經元細胞可興奮性的同時維持其形態學上的復雜性。 簡單易用 只有電生理專家才會使用Maestro MEA系統?不存在的!只要把細胞培養在MEA板上,然后把板放入Maestro MEA儀器檢測倉內,即可記錄神經元電生理數據。Axion提供的一系列軟件會幫您完成剩下的數據分析步驟,甚至連可直接用于文獻發表的圖表都搞定了。您也可以! PART III 應用方向簡介
神經疾病細胞模型,藥物神經毒性篩選,神經細胞功能檢測,光遺傳學,模式生物表型篩選,干細胞開發及質控,神經球、腦類器官研究
帕金森
脆性X綜合癥
高通量微電極陣列+光遺傳的強大組合
Axion公司創新的高通量光遺傳刺激系統Lumos,可對MEA板內樣本進行光強(1-100%)和光照時長(低至100ms)的控制。您可以選擇多至四種不同波長的LED光源來刺激單孔內的細胞,并行處理通量高至96個。您也可以對每個孔內混合培養細胞樣本中的某一類細胞群體進行單獨控制,建立高階神經疾病模型。所以,通過在軟、硬件上與Maestro系統無縫整合,Lumos可以助您精準、靈活、高效地實現神經細胞網絡的調節及實時的功能檢測。
Axion BioSystems
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