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儀器簡介
ForteBio Octet RED384 生物分子相互作用分析系統采用**的生物膜干涉技術(Biolayer Interferometry Technology 簡稱BLI技術),實現對生物分子與化合物相互作用高通量、快速、實時的檢測。可提供親和力、動力學、濃度等信息。生物膜干涉技術是利用光的干涉波強度與波長對應的干涉圖譜的相應變化,實時感知生物分子間結合效率或濃度信息。該技術無需對樣品分子進行標記、其高檢測靈敏的特點保證了客戶可以快速、準確的篩選與靶蛋白相互作用的小分子藥物。
ForteBio Octet RED9384 統廣泛應用于藥物研究與開發,包括小分子化合物、天然產物提取物、蛋白質、抗體、多肽藥物以及核酸藥物等各類基于藥物與靶標特異性親和力的藥物篩選和開發。主要應用有:藥物靶點的鑒定和確認;高通量藥物篩選;候選藥物鑒定和優化;藥代動力學和藥效動力學;疾病形成機理、信號轉導過程及致病關鍵生物分子研究;蛋白的結構與功能研究等方面。
應用范圍
- 藥物靶標的鑒定與確認
OctetRED384系統可提供實時結合數據來揭示特殊分子是如何進行細胞過程調控,并且幫助您對那些引發通路紊亂并*終導致病變的異常分子相互作用施以精確定位。Octet RED384系統的384孔板模式可使您快速實施全方位的構效關系研究,特別是針對大量結構變異樣本的高通量動力學篩選。
?研究細胞信號的調控機理
?剖析配體/受體的相互作用
?發現新的治療靶標
- 藥物篩選以及候選藥物分子的檢定優化
Octet RED 384 系統可同時檢測16個樣品,適合較高通量的藥物篩選。可利用疾病發生、信號轉導及表達調控中的關鍵生物分子作為靶標,篩選和分析潛在的治療性藥物。通過對候選物的親和力和解離動力學數據進行甄選,可以盡量避免在研發后期階段因不理想的結合表征數據而導致的失敗。
?適用樣品范圍廣:可**適合各類待測樣品:蛋白,核酸,多肽,小分子化合物等;包括含血清的培養液,離心上清液,細胞裂解液,含DMSO溶液等各類粗樣品。
?基于動力學篩選和解離速率排序
?可用于大規模藥物篩選的通量
- 候選藥物的優化
Octet RED384 系統可以獲取獨到的非標記動力學特征數據,并指導活性化合物通過進一步的篩選從而發展成真正的先導候選藥物分子。該系統以其全面的自動化和專業的數據分析工具,能夠顯著的加快藥物優化進程
?藥物結合受體表征分析
?表位分選自動分析工具
?抗體親和力以及成熟化工程
- 蛋白濃度定量
Octet RED384 系統通過繪制不同濃度抗體針對同一蛋白的結合率(Binding Rate)的標準曲線,在檢測未知蛋白濃度樣品時,通過其與特異結合蛋白的結合率就能計算得到該蛋白在目標溶液中的濃度。相較于傳統的蛋白濃度定量檢測方法,如光吸收法,ELISA,HPLC等,Octet系統具有梯度范圍寬,通量高,檢測重復性好,無需復雜的樣品前處理等特點。
設備主要技術參數
1.系統可以實現的功能:全自動的傳感器移動,樣品盤溫度控制和搖動。全自動基線校正。用于活性分子與靶點結合的機理研究,并在分子水平上對功能機理進行揭示,研究信號通路,調控機理,結構分析,蛋白質結構,藥物篩選,或進行有特定靶標的生物功能分子的篩選。
2.檢測技術:生物膜層干涉技術,可以檢測不可逆的生物分子結合
3.檢測模式:采用平行檢測模式,可同時檢測 16 組獨立樣品
4.檢測樣品對象:可對小分子化合物,DNA,多肽,蛋白質,寡糖或寡核苷酸,細胞,病毒或細菌等進行檢測
5.對血清,血漿,細胞裂解液,細胞上清液,組織勻漿等粗制樣品中的蛋白質測定濃度
6.浸入式傳感器,非破壞性檢測;
7.樣品可回收,傳感器可再生重復使用
8.傳感器種類 不少于17 種
9.檢測器類型:高靈敏度光干涉檢測器
10.檢測器數量: 16組光干涉檢測器,每通道對應一個檢測孔,每孔獨立。
11.加樣方式:支持96或384微孔板;
12.濃度定量范圍:0.05ug/ml-2000ug/ml;
13. 樣品體積:40-220ul;
14. 結合常數范圍: 101-107 M-1S-1
15. 解離常數范圍: 10-6-10-1 S-1
16. 平衡親和力: 10-3-10-11 M
17. 檢測分子量下限:≤ 150 Dal;可以進行小分子檢測;
18. *樣品分析速度:≥ 600樣品/小時;
19. 基線噪聲:≤ 3.5 pm (RMS),基線漂移:≤ 0.1 nm/小時
20. 數據采集和顯示:實時數據采集和顯示;數據處理工具可以根據樣品的類型和操作步驟來顯示;數據歸納工具可以對數據進行組織和歸納,滿足數據顯示、處理和分析的需要;反應顯示工具可以對反應和樣品數據進行顯示、隱蔽或選擇分析。
21. 數據分析處理:數據分析的動力學分析曲線擬合至少3種模型可選: Langmuir (1:1模型);二價分析物;雙分析物競爭;雙配體位點競爭;數據分析的濃度分析2種模型可選:結合速率Vs濃度,結合信號Vs濃度;數據分析結果支持多種輸出格式,Excel, JEPGd等,可直接導入其他專業數據分析軟件;
設備工作條件
(1)電源:220V
(2)環境溫度:10℃~30℃;
(3)環境濕度: 20%~80%