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4D Lifetest TM -創新標準集成化單細胞凝膠電泳系統
彗星實驗分析(CA)的變化性一個重要問題,因為不同參數的旋轉柱不同, 例如:濃度、放卷時間、電泳持續時間、電壓梯度、電泳運行溫度、使用的電泳槽類型四分之一的氣象參考標準。這些必然會導致不同實驗室測試結果的差異. 很大程度減少了彗星實驗(CA)變化性帶來的影響物理參數(電泳槽)、協議(處理)、標準(生物樣品參考)。
瑞士4Ddlifetec公司開發了具有以下優點的創新4Dlifetank單細胞凝膠電泳系統:
1、提供精確的溫度和溫度控制
2、具有**、高均勻性和可控電場
3、通過96孔凝膠定位板(GSP)的開發,允許高穿透性分析
單細胞凝膠電泳系統對比情況
1、4DLifetank單細胞凝膠電泳系統 VS 傳統的商業產品:
為了證明4dlifetank的準確性,我們選擇了基準商用CA電泳裝置進行彗星分析CA。 使用行業參考細胞標準C0(未處理)和C1-C3(代表處理細胞內的DNA損傷) 我們使用制造商建議(表1)進行彗星分析CA。
使用蔡司AXIO顯微鏡(100個可重復彗星計數)并運用OpenComet plugin的成像軟件進行分析。
2、4D Lifetank單細胞凝膠電泳系統 可變性評估:
為了評估可能的彗星分析CA變異性,我們比較了: a)斑點;b)孔板;c)進行試驗的天數
3、單細胞凝膠電泳系統zui優協議: 我們羅列了以下流程圖中的每個參數證明4D LifeTM彗星實驗平臺 zui優協議(表1)
4、4D Lifetank單細胞凝膠電泳系統 zui優化: 為了評估我們zui優化的彗星實驗CA協議,我們用行業標準的生物樣品做測試 展望—zui優的生物標準品 作為增加細胞DNA損傷范圍和證明4Dlifetank性能的額外步驟, 我們創建了一套生物參考標準。電離輻射是易受傷害的強破壞劑, 因此使用X射線照射的A549電池(0-12Gy)并在4DLifeTank上運行。
結論:
1、通過使用4dlifeTank彗星實驗平臺,我們觀察到劑量反應改善,結果變異性降低
2、通過進一步優化CA協議,我們進一步提高了CA的敏感性,并進一步降低了變異性。
3、通過優化生物樣品參考,并在4DLifeTank彗星實驗平臺中以優化的協議運行這些參考,可以對自己的生物樣品進行基準測試。